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文章分享|MIRA核酸快检，助力男性Y染色体AZFc区域缺失早期诊断
近年来，男性不育问题逐渐受到广泛关注，其中，Y染色体微缺失是导致男性不育的一个重要原因，尤其是Y染色体AZFc区域的缺失。由于此类缺失的早期症状不明显，且传统检测方法需要高端设备和较长时间，很多基层医疗机构难以开展相关检测，错失了早期干预的时机。因此，如何开发一种简单、快速且高效的检测方法，成为解决这一问题的关键。 为了弥补这一空白，徐州妇幼保健院张燕团队基于MIRA技术平台成功开发了两种新的快速检测方法，能够有效、快捷地检测男性Y染色体AZFc区域缺失。 研究设计与实验流程
样本收集与分组 本研究从临床中收集了男性不育患者的血样或精液样本。根据Y染色体上的SRY基因位点、sY254和sY255位点是否缺失，将样本分为以下三组： 1.AZFc缺失组：确认AZFc区域缺失的样本。 2.AZFc非缺失组：未出现AZFc区域缺失的样本。 3.阴性对照组：无任何Y染色体微缺失的正常男性样本。 检测位点选择 本研究设计并应用了以下两种新型检测方法： 三重实时荧光（RT-MIRA）方法：通过三重探针同时检测sY254、sY255和SRY基因位点的荧光信号，利用实时荧光技术实现快速检测。与传统qPCR方法相比，RT-MIRA方法的操作更为简便，检测时间显著缩短。 三重MIRA-LFD方法：MIRA结合三重层析试纸条（LFD），通过目视检测层析条带的颜色变化，快速判断样本是否存在Y染色体AZFc区域缺失。这种方法不仅能够提供实时反馈，还能显著降低对实验设备的依赖。 数据分析 为评估这两种新方法的准确性和可靠性，研究使用了Kappa一致性分析等统计学方法，与传统的多重实时荧光定量PCR方法的结果进行对比。通过分析检测结果的一致性，进一步验证新方法在临床应用中的可行性。 新方法的效果与优势
一 方法学评价 研究显示，三重RT-MIRA和三重MIRA-LFD方法能够在39℃的环境下，在短短15-20分钟内完成扩增反应，检测限与传统多重实时荧光定量PCR方法相当。与传统方法相比，新方法的反应时间明显缩短，且对实验环境的要求更低，操作也更加简便。 二 临床样本检测 在50例临床样本的检测中，使用新方法的结果与传统PCR方法完全一致。Kappa一致性分析结果显示，新方法的检测结果与传统方法之间的相关性极高，表明新方法在准确性和可靠性方面具有高度一致性。 三 特异性与灵敏度 经过综合评估，新方法在检测Y染色体AZFc区域缺失方面，表现出了极高的特异性和灵敏度。即使在低浓度样本中，新的检测方法也能准确检测出AZFc缺失，极大地提高了早期诊断的准确性。
优势一 高效快速 MIRA技术能够在39℃的环境下，仅需15-20分钟就完成整个检测过程，显著缩短了检测时间。 优势二 操作简便 MIRA技术不需要复杂的实验操作和昂贵的设备，普通实验室即可进行检测。 优势三 低成本 相较于传统PCR方法，MIRA技术整体解决方案的综合投入成本低，适合基层医院和POCT环境使用。 优势四 环境适应性强 MIRA技术对实验环境的要求较低，能够在资源有限的环境中快速、准确地完成检测。 通过三重RT-MIRA和三重MIRA-LFD这两种新方法的早期检测，可以为男性不育患者提供及时的诊断，进而为他们制定科学的生育计划，帮助其提高生育率。特别是对有家族历史或长期不育症状的男性，提前发现Y染色体微缺失，为患者提供早期干预措施，能够有效降低不育风险。
K8凯发国际多酶恒温快速核酸扩增技术MIRA技术在恒温39°C-42°C下核酸扩增，反应时间仅为5-20 min。此外，不需要严格的实验室条件，应用场景多元化：综合医院检验科、基层医疗、居家检测、田间地头等。 试剂产品形态多样化：冻干粉、冻干微球等；显示结果的多样性：凝胶电泳、荧光曲线、胶体金试纸条等。试剂性能稳定、便于操作、方便存储运输。 并以MIRA为核心平台技术研发出“超快速核酸释放技术”、“双通道恒温荧光检测仪”、“一体化全自动封闭检测系统”、“自测型核酸检测装置”等一系列配套产品，打造快速分子检测整体解决方案。 |
